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      TUNEL檢測
      目錄號:MY-26 規格:

      TUNELTdT-mediated dUTP nick end labeling)技術原理是通過脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)介導帶有顯色系統或熒光的dUTP連接到凋亡細胞或凋亡小體中由核酸內切酶切斷的DNA短鏈3’-末端缺口,從而可進行組織切片和培養細胞的凋亡檢測,實際上是分子生物學與形態學相結合的研究方法,對完整的單個凋亡細胞核或凋亡小體進行原位染色,能準確的反應細胞凋亡最典型的生物化學和形態特征,可用于石蠟包埋組織切片、冰凍組織切片、培養的細胞和從組織中分離的細胞的細胞凋亡測定,并可檢測出極少量的凋亡細胞,靈敏度遠比一般的組織化學和生物化學測定法要高,因而在細胞凋亡的研究中已被廣泛采用。  

         

      技術路線:

       

       

       

       

       

       

       

       

      技術要點

      1.  使用pH中性的固定液固定組織或者細胞,避免使用酸性或者堿性固定液,以免出現人為DNA損傷;推薦使用4%甲醛溶液(溶于pH7.4 PBS中)。

      2.  在操作過程中避免出現干片現象。

      3.  根據標本類型決定孵育時間(蛋白酶K、TdT等),保證最佳效果。

      4.  使用過程避免將TdT酶置于冰上;避免反復凍溶。

      使用新鮮的H2O2溶液,孵育后立即將標本放入PBS清洗(H2O2可導致DNA損傷)。

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      參考資料

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      京公網安備 11011402011307號

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